血生化檢測

血生化檢測是對實驗動物血（xuè）液內離子、脂類、蛋白質和各種酶等物質濃度的檢測。這（zhè）些檢測項目的變化一般（bān）都（dōu）與特定器官（guān）的功能有關，對評估實驗動物健康狀態以及驗證實驗動物造模是否成（chéng）功等，都具有重（chóng）要指導意義。由於血生化涉（shè）及項目（mù）較多，本號（hào）將分兩篇對其進行介紹。

絕大多（duō）數血生化檢測都可以用血清或肝素血漿樣本檢測，兩者的檢測（cè）結（jié）果會有差異，但（dàn）這（zhè）種差異並（bìng）無臨床意義。然而，對於（yú）需要長期監測動物，相同指標應在監測周期內選擇相同樣本進行檢測。樣本的（de）保存和抗凝劑的使用均應根據不同的檢（jiǎn）測項目進行選擇。此外，樣（yàng）本采集的質（zhì）量可直接影響檢（jiǎn）測結果。

對於大多數血生化（huà）項目，樣本（běn）應在采集後及時檢測，如不能及時檢測（cè），3天內可4℃或冷凍（dòng）（-20℃或更低溫度）保存；若保存時（shí）長超出3天，需冷凍（dòng）（-20℃或（huò）更低（dī）溫度）保存，切忌將樣本反複凍融後（hòu）進行檢測。但一些生化項目低溫保存也會影響其活性，如乳酸脫氫酶和穀草轉氨酶。

尿素、鉀（jiǎ）、鈉離（lí）子避免使用含銨鹽類抗（kàng）凝劑進行檢（jiǎn）測；穀（gǔ）丙轉氨酶、肌酸激酶和總蛋白避免使用枸櫞酸鈉抗凝劑進行檢測。本文僅列出部分生化項的抗凝劑選擇，更多信息（xī）可參考WHO 2002年發布的《實（shí）驗室檢查（chá）中抗凝劑的使（shǐ）用》。

齧齒動物尤其實驗大小鼠（shǔ）的血生化參考範圍，目前仍沒（méi）有建立標（biāo）準參考。這與實驗大小（xiǎo）鼠的品係眾多（duō）有關。已有文（wén）獻證明，不同品係的小鼠血生化會有差異。並且（qiě）血生化的結果與動物的年齡和性別（bié）等因素相關。另外，由於（yú）不同機構使用的檢（jiǎn）測方法不同，如（rú）幹式生化分析儀（yí）和濕式生化分（fèn）析儀（yí），且使用試劑盒品牌不同、試劑盒（hé）檢測原理不同等（děng），均會導致結果不同。這些因素（sù）都（dōu）導致了實驗大（dà）小（xiǎo）鼠的血生化標準參考範圍無法建立，目前可查到的參考範圍，均應根據內部情況進（jìn）行參考。

蛋白質與肝膽功能檢測

1.   總蛋白（Total protein, TP）

血液等體液中（zhōng）的蛋白質種類（lèi）眾多，但目（mù）前尚無一種常（cháng）規檢測技術可以對體液中各（gè）種類型蛋白質總量進行準（zhǔn）確測定。因此，臨（lín）床（chuáng）對體液（yè）中總蛋白（bái）質測定通常是（shì）假設所有的體液蛋白質均是單純蛋白質，且各種體液蛋白與（yǔ）化學試劑的反應性均一致。基（jī）於以上兩個假設，目前測定總蛋（dàn）白最常用的方法（fǎ）有雙縮脲法和紫外分光光度法。血清（qīng）中的總蛋白實際檢測的是（shì）除纖維蛋白原以（yǐ）外（wài）的成分，因（yīn）此用血漿測定總蛋（dàn）白較血清測定值偏高。

總蛋白的濃度主（zhǔ）要反應肝髒合成（chéng）功能和（hé）腎髒病變造（zào）成蛋白質丟失情況，可以用來判斷機體的水合狀態，脫水的動物總蛋白濃度會相對升高，即高（gāo）蛋（dàn）白（bái）血症。當動物出現慢性肝髒疾病、骨髓瘤、自身免（miǎn）疫性疾病、慢性炎症和感染等，會（huì）導致TP和球（qiú）蛋白同時（shí）升高。

過度水（shuǐ）合動物總蛋白濃度會（huì）相對降低，即低蛋白血症，此時動物可能會（huì）出現浮腫、胸腔或腹腔積（jī）液。TP和白蛋白同時降低常見（jiàn）於肝功能受損導致蛋白質合成減少、營養不良、蛋白丟失過多、消（xiāo）耗增加等病理性因（yīn）素。

2.   白（bái）蛋白（Albumin, ALB）

ALB由肝實質   細胞（bāo）合成（chéng）分泌，是血漿中含量最多的蛋白質（zhì），大部分動物的白蛋白占血（xuè）漿蛋白的（de）35%~50%。ALB是動物機體內重要的營養蛋白，參與維持（chí）內環境穩定，也是血漿中多種物質的主要轉運蛋白（bái）。當出現炎性疾（jí）病、漿細胞瘤（liú）、淋巴瘤、腎小球腎炎、營養不（bú）良、過度水合等，均會導致齧齒（chǐ）動物出現血清白蛋白的降低；ALB升高（gāo）則多見於脫水（shuǐ）動物。

3.   球蛋白（Globulin，GLB）

球（qiú）蛋白可（kě）以（yǐ）分為α球（qiú）蛋白（bái）、β球蛋白和γ球蛋白，大（dà）多（duō）數α球蛋白和β球蛋白（bái）由肝髒合（hé）成，γ球蛋白由漿細胞合成。α球蛋白中比較重要（yào）的兩種蛋白質分別是高密度脂蛋白和極低密（mì）度脂蛋白；β球蛋白包括補體（C3、C4）、轉鐵蛋白和鐵蛋白；γ球蛋（dàn）白（即（jí）免疫球蛋白）包括IgG、IgD、IgE、IgA和IgM。

球蛋白（bái）的濃度一般通過總蛋白與白蛋白的差值來進行計算（suàn）。球蛋白減少主要由於合成減少，如使用（yòng）免疫抑（yì）製劑；球蛋白的增（zēng）加多見於γ球（qiú）蛋白，常見原（yuán）因有慢性肝髒（zāng）疾病、免疫（yì）性疾（jí）病、骨髓瘤等。

4.   白蛋白/球蛋白（bái）（A/G）

白球比應結合蛋白質指標進行分析，不同種類、品係、年齡、性別動物的白球比（bǐ）都有差異，很多（duō）病理狀態（tài）會改變白球比。當白（bái）蛋白和球（qiú）蛋白均（jun1）變化（huà）時，如出血導致白蛋（dàn）白（bái）和球蛋白丟失、脫水導致球蛋白和白蛋白增加時，A/G比值將變化不（bú）大或保持在正常範（fàn）圍內（nèi）；當其中（zhōng）一個數值發生變化且占主導時，那麽A/G比值將發生異常，如免疫球蛋白（bái）的產生導（dǎo）致A/G比值降低、免（miǎn）疫球蛋白缺乏導致A/G比值增高。在臨床（chuáng）上，ALB、TP、GLB和A/G比值應結合一起進行分析。

5.   穀丙轉氨酶（Alanine aminotransferase, ALT）

臨床上廣泛用來（lái）作為（wéi）肝（gān）細胞損傷指標，也是中間代謝的（de）關鍵酶。ALT主要存在於肝髒，但（dàn）也廣泛存在（zài）於腎髒（zāng）、心肌、骨骼肌、胰腺等組織中，這些組織出現損（sǔn）傷或壞死，也會導致血清ALT水平（píng）升高。由於ALT主要存（cún）在於細胞（bāo）質，釋放比較容易，因此ALT升高可出現在（zài）組（zǔ）織損傷早期。血液中ALT的水平與肝損傷的嚴重程度不呈現相關性（xìng），ALT通常（cháng）會在肝損（sǔn）傷12h內升高，並在24~48h內達到峰值，除非存在慢性（xìng）肝損傷，一般（bān）情況（kuàng）下血清（qīng）ALT水平會在幾周內恢複正常。比較特殊的是，豚鼠中ALT活性較低，因此ALT不適合用（yòng）來作為判斷其肝損傷的標誌物。

目前已發現在人類、大小鼠和狗中，ALT具有兩種亞型，分別為ALT1和ALT2，其中ALT1主（zhǔ）要在腎髒、肝髒（zāng）、脂肪和心（xīn）組織中表達；而ALT2主要（yào）在（zài）肌肉和脂肪中表達。在小鼠中，ALT2被認為是脂肪變性的標誌（zhì）物。ALT亞型的區分可以更（gèng）精準反應器官損傷情況，但目前ALT分型的檢測尚未廣泛應用在實驗動物檢測中。

6.   穀草轉氨酶（Aspartate aminotransferase, AST）

AST主要存在於肝細胞（bāo）內，在正常大鼠血清中，細（xì）胞質（zhì）中的AST約占總AST活性82%，線粒體膜上的AST約占總AST活性18%。此外，AST也存在於其他組織中，如心髒、骨骼（gé）肌、腎（shèn）髒、胰腺等，這些（xiē）組織損傷或壞死時，血清中AST也會升高。AST水平升高表示非特異性肝（gān）髒損傷，齧（niè）齒動物在應激狀態或肌內注射也可能（néng）導致AST升高，AST升高應先檢（jiǎn）查血清或血漿樣（yàng）本是否溶（róng）血，結合肌酸激酶水平，排除是否（fǒu）為肌肉損傷（shāng）導致AST升高，上述原因排除後，方可考慮為肝損傷導致AST升（shēng）高。

7.   堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase, ALP）

ALP是一組在酸性條件下水解磷酸單（dān）酯類化合物（wù）的酶，在許多組織中存在其同工酶，尤其是肝膽係統、骨骼內的成骨細胞、軟骨內的成軟骨細胞、腸道細胞。ALP水平與齧齒類動物的年齡及性別具有相關性，處於生長期的未成年動物ALP水平較高（gāo），隨著動物年齡的增（zēng）長，ALP水平明（míng）顯降低；且大多數雌性動物ALP水平低（dī）於（yú）雄性動物。而ALP的病理性升（shēng）高則常見於發生肝膽疾病、骨（gǔ）骼（gé）疾病、惡性腫瘤時的動物。

8.   γ-穀氨酰轉移酶（Gamma-glutamyltransferase, GGT）

GGT存在於許多組織中，包括腎髒、胰腺、腸道和肌細胞（bāo）。GGT升高多見於動物發生肝髒疾病、膽管阻塞以及急性胰腺炎等。需要注意的是，GGT在（zài）腎（shèn）髒中濃度最高（gāo），但發生腎髒疾病時，GGT的增加並不明顯，這是（shì）因為GGT會從受損的管狀（zhuàng）上皮細胞中釋放到尿液中，而不是血液中。

9.   膽紅素（sù）（Bilirubin, Bil）

膽（dǎn）紅（hóng）素是一種不可溶性分子，由脾髒內巨噬（shì）細胞降解血紅蛋白產生，是各種含血紅素蛋白中的（de）血色素在一些係列酶作用下的降解產物，與脂類的消化吸收及黃疸形成（chéng）具有（yǒu）重要關係。膽紅素在光照下分（fèn）解，因此，樣本應避光保存以保證結果準確性。當動物出現膽（dǎn）汁運輸障礙或腸道吸收不良時，會導（dǎo）致膽紅素降低；當（dāng）動物出現（xiàn）溶血性疾病（bìng）導致紅細胞破壞或內出血時（shí），可使膽紅素含量增高。

10.  膽汁（zhī）酸（Bile acids, TBA）

齧齒動（dòng）物的膽汁酸代謝與人類有所不同，大小鼠的膽汁酸（suān）以（yǐ）膽固醇為原料在（zài）肝細胞中合成，由肝源性分子組成，並主要與牛磺酸（suān）結合。膽（dǎn）汁酸可以促進脂類的消化吸收、調節膽固（gù）醇的代謝以及促進膽汁分泌。當動物出現肝功能受損、膽（dǎn）道阻塞等疾病時，均會導致（zhì）膽汁酸水平增加（jiā）。

腎髒（zāng）功能檢（jiǎn）測

1. 尿素（Urea）

尿（niào）素是哺乳動物蛋白質代謝的主要終末產物，可自由濾過腎小球，當腎實（shí）質受損時（shí），腎小球濾過率下降，血尿（niào）素濃度會升（shēng）高，因此可以通過測定尿素水平來評估腎功能。需要注意的是，產（chǎn）尿酶菌（如金黃色葡萄球菌/變形杆菌屬/克雷伯菌屬）汙染的血液樣本可導致尿素分解，導致尿素水平下降，為（wéi）避免這種情況，樣本采集後應及時進行檢測，如不能及時檢測，應將（jiāng）樣本放置在冰（bīng）箱冷藏中保存。另外（wài）不同性別及（jí）年齡差異，也會影響尿素水平，隨著動物年齡增長，尿素水平會呈現下降（jiàng）趨勢。尿素的增加多見於高蛋白飲食、脫水以及腎功能衰竭等。

2. 肌酐（Ceatinine, Crea）

血（xuè）肌酐經（jīng）腎小球濾過進入（rù）原（yuán）尿，並且不被腎小管重新（xīn）吸收，機體內肌酐應保持恒定，因此測（cè）定血肌酐水平可以用（yòng）來評估腎功能。但是和尿素一樣，肌酐不是腎功能的準確指標，當腎功能損傷近75%時，方（fāng）可引起血肌（jī）酐水平升高。肌酐降低則多見於動物（wù）營養不良、貧血等。

3. 尿酸（Uric acid, UA）

尿酸（suān）是嘌呤堿基代謝產物，主要存在於肝（gān）髒中，小部分可經肝髒隨膽汁排泄。尿酸（suān）可自由濾過腎小球，也可腎小管排泄。因此，排除外（wài）源（yuán）性尿酸幹擾，血尿酸可（kě）反（fǎn）映腎小球濾過功能和腎小管重（chóng）吸收功能（néng）。當機體出現（xiàn）急性或慢性腎炎、多發性骨髓瘤等均會導致（zhì）UA升高；肝髒壞（huài）死、肝功能衰竭等病理（lǐ）原因則會導致（zhì）UA降低。