
齧齒類動物血常規結果分析注(zhù)意事項
血液學檢查是動(dòng)物疾病狀態評估、術前檢查和常規體檢中(zhōng)必不可少的內容。評估血常規檢測報告的可靠性並解讀其結果是獸醫朋友們的工作日(rì)常。本文就血液學檢查的一(yī)些要點進行分析探討。
采血是進行血常規檢查的第一步,本公眾號曾經發表《獸醫隨筆:實驗動物采(cǎi)血指南》一文,介紹采(cǎi)血(xuè)量和采血點的(de)一般指導意見。
進行血液學分析時通(tōng)常建議用EDTA抗凝管采集樣(yàng)本,但采集時應該(gāi)注意抗凝劑和血液(yè)的比例。樣本質量會顯著影響檢測結果,常見的樣本質量問題有:
抗凝效果不佳導致出現血凝塊,會使血小板(PLT),白(bái)細胞(WBC),紅細胞(RBC),紅細胞(bāo)壓積(HCT)假性降低;
溶血會使RBC、HCT假性降低的同時平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平均紅(hóng)細胞血紅蛋白(bái)(MCH)假性升(shēng)高(gāo);
乳糜(mí)血會(huì)使血紅(hóng)蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性升高;
樣本不(bú)新鮮會使(shǐ)紅細胞形態(tài)發生(shēng)改變導致MCV和(hé)HCT假性升高,MCHC假性降低,同時白細胞形態也會發生改變。
紅細胞、白細胞和血小板是血常規報告中需要解讀的三個方(fāng)麵。
紅細胞
相比於人及其他哺乳類動物,齧齒類動物的紅細胞(bāo)自有其特征。倉(cāng)鼠(shǔ)的RBC約6.0微米,豚鼠的約7.8微米。大鼠出生時紅細胞(bāo)較大(10.03 μm),但在(zài)出生後30天內(nèi)變到小於6μm。小鼠RBC大小約4-7μm,隨(suí)年齡增長而增(zēng)加(jiā)。多色性(xìng)是齧齒類動(dòng)物血象的一個常見(jiàn)特征。在豚鼠血塗片上還可見紅(hóng)細胞疊連。特定疾病模(mó)型小鼠中,如β地中海貧血模型小鼠RBC可(kě)觀(guān)察到異常形態,例如靶形紅細胞、棘(jí)形狀(zhuàng)紅細(xì)胞、淚滴狀紅細胞、破碎(suì)狀紅細胞、有核紅細胞等。
(圖片來源:https://www.researchgate.net/publication/233535082)
和大多數哺乳動物(包括人)不(bú)同的是,新生齧齒類動物(小鼠、大鼠、豚鼠、沙鼠)的血(xuè)紅蛋白和血(xuè)細胞比(bǐ)容值低於成年動物;新(xīn)出生大鼠有(yǒu)16%的網織紅細胞,成年後則減少至2.5%;據報道,大鼠、沙鼠的RBC計數存在性別差(chà)異(yì),雌性的計數通常比雄性高。不同品係的小鼠和大鼠,血紅蛋白值也會有很大的差異。
樣本(běn)采集部位或麻醉的影響會導致血常規數據的變化。例如,從大鼠尾部采集的樣本中的血紅蛋白和紅細胞比容比從(cóng)腹主動(dòng)脈或心髒中采集的樣本中要高。豚鼠(shǔ)中已經證實RBC值可能由於麻醉期間發生脾內紅細(xì)胞扣留而降低。
影響RBC參數的非致病性條(tiáo)件還包括妊娠、季節(jiē)變化等。在大鼠中,紅細胞比容在妊娠期間減少。在倉(cāng)鼠(shǔ)中(zhōng),RBC計數、血(xuè)紅蛋白濃度和紅細胞比容在冬(dōng)眠期間升高,這(zhè)是因為在冬眠(mián)期間(jiān),倉鼠基礎代謝率降低(dī),RBC壽命延長了(le)。
紅細胞和貧血
紅細胞指標重(chóng)點關注RBC、HCT和Hb,它們的變(biàn)化可以提示(shì)動物貧(pín)血或紅細胞增多。
齧齒類動物中並沒有原發性的紅(hóng)細胞增多症,但可能見於輕度脫水的(de)動物(wù)。貧血則較(jiào)為常見。初步判斷為貧血後,還需要關注平均紅細胞體積(MCV),MCH和MCHC,可用於輔助判斷貧血類型,這(zhè)三項都偏低常見於缺鐵性貧血(xuè),而高於正常範圍多見於葉酸或維生素B12缺乏引起的貧血。網(wǎng)織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞,是反映骨髓造血功能的重要指標。當(dāng)其升高時,提示骨髓造血功能旺(wàng)盛,可能有溶血性貧血、缺鐵性貧血等;而當其降(jiàng)低時,可能有再生障礙性貧血、急性(xìng)白血病等。
儀器分析的血常規化(huà)驗單隻能給出各種細胞的數量,但並不(bú)能給出細胞形態的異常描述。因(yīn)此(cǐ)為了更準確分析血液(yè)學檢查結(jié)果還建議對血樣塗片進行形態學檢(jiǎn)查。
RBC形態學可(kě)區(qū)分(fèn)貧血的原因:出血、溶血、缺鐵、非(fēi)再生性貧血、骨髓疾病或(huò)淋巴細胞增(zēng)生性疾病(白血病)等。
如果診斷為溶血性(xìng)貧血,則需要在血塗片中尋找血液寄生蟲的證據,如球狀附(fù)紅細胞體和鼠血巴爾通體可能導致小鼠(shǔ)或大鼠貧血。如果出現小紅細胞增多症、血色素減(jiǎn)少、總蛋白(bái)低、血小板增多(duō)和網織紅細胞計數升高則(zé)提示有慢性失血,建議檢查體表寄生蟲,在虱子嚴重感染的豚鼠和大鼠中可見這種現象。
白(bái)細胞(bāo)
白細胞是機體抵(dǐ)禦(yù)感染、調控炎症、免疫和造血的關鍵。
齧(niè)齒類動物的白細胞形態和其他哺乳動(dòng)物相似,但又有一(yī)定區別,齧齒類動物的粒細胞被稱為嗜異(yì)性或假嗜酸性粒細胞,因為它含有紅色顆(kē)粒,與嗜酸性粒細胞相似。豚鼠有獨特的Foa-Kurloff細胞(一種T淋巴細胞),含(hán)有一個大的細胞質(zhì)包涵體。齧齒類動物的白細胞類型與其他哺(bǔ)乳動物相似,但淋巴細胞數量遠超過粒細胞:淋巴細胞約占86%,中性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜酸性粒細胞約占1% ~ 4%,嗜堿(jiǎn)性粒細胞很少(shǎo)。
WBC計數每天都會(huì)發生波動,因此采集樣本的(de)位置和時間不同(tóng),結(jié)果也(yě)可能不同。中性(xìng)粒細胞(bāo)計(jì)數隨著大鼠年齡的(de)增長(zhǎng)而增加,淋巴細胞計數隨(suí)著年齡的增長而減少。
豚鼠的Kurloff 細胞
(圖片來源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)
白細胞(bāo):淋巴細(xì)胞
淋巴細胞(bāo)增(zēng)多
淋巴細胞分(fèn)為T淋巴細胞和B淋巴細胞,大多在外周淋巴(bā)組織中生成(chéng)並在血液和淋巴組織中循環。淋巴細胞的增(zēng)多大多(duō)為生理性(xìng)的。反應性淋(lín)巴細胞增多的原(yuán)因(yīn)包括注射疫苗後的短暫反應、長期免疫刺(cì)激、甲狀腺功能亢進等;腎上腺(xiàn)皮質功能減退也會導致淋巴細胞增多,並常伴隨低血糖、電解質異常,出現高鉀低鈉和高鈣血症;淋巴(bā)瘤、胸腺瘤可見淋巴細胞異常升高,淋巴細胞性白血病則在淋巴細胞異(yì)常升高的同時伴有其他細胞係的減少。
淋巴細胞減少
淋巴細胞減少最常見的原因是內外源性(xìng)皮質類固醇激素增多,導致其從血(xuè)液循環中轉移到淋巴組織中。在急性炎症反應、病毒感染以及發生內(nèi)毒素血症和敗血症時,也可見淋巴細胞減少。免(miǎn)疫缺陷病毒感染、免疫抑製藥物的(de)使用也會讓淋巴細胞生成減(jiǎn)少。淋巴回流受(shòu)阻或丟(diū)失也會(huì)讓其計數減少。
(A)淋巴細(xì)胞,特征是有深紫(zǐ)色圓形核;(B)單核細胞,特征是有腎形細胞核;(C)中性(xìng)粒細胞,特征為有紫色多小葉細胞核。
(圖片來源:Bjorner & Zhu, 2019)
白細胞:中性粒細胞
中性粒細胞增多
與其他哺乳動物一樣,急性炎症反應的特征是(shì)中性粒細胞增多並有核左移。但並不是出現中性粒細胞增多就意味著急性(xìng)炎症反應,動物經曆(lì)劇烈運動(dòng)、驚嚇傷心等強烈情緒後也可出現(xiàn)生理性中性粒細胞增多,但不會出現核左移。
應(yīng)激或皮質類固醇也可導致(zhì)動物出現中性粒細胞數量(liàng)增(zēng)加,無左移。
此外慢性粒細胞性白血病、中(zhōng)性(xìng)粒細胞功能障礙(ài)也可使中性粒細胞數量增加,同時(shí)出現核左移、多組織髓(suǐ)外生成粒細胞、血小板減少等(děng)異常。
正常情(qíng)況下,外周(zhōu)血液中性粒細胞以分(fèn)葉核為主,胞核常分為2~5葉,杆(gǎn)狀核較少(shǎo)。中性杆狀核粒細胞增多(duō)或(和)出現晚幼粒細胞、中幼粒細胞,甚至原始/早幼粒細胞的現象,稱為核左移。
中性粒細胞減少
中性粒細胞減少也非常常見,其中臨床常見的因素為嚴(yán)重的細菌感染,例如肺炎、敗(bài)血症、腹膜炎(yán)等,常會伴隨核左(zuǒ)移和(hé)中毒性變化。骨髓疾病、藥物毒性、病毒感(gǎn)染和腫(zhǒng)瘤等也可造成中性粒細胞(bāo)減少,同時可能會伴有紅(hóng)細胞和血小板的減少(shǎo)。
白細胞:嗜酸性粒細(xì)胞
嗜酸性(xìng)粒細胞主要聚集在皮膚、消化道和呼吸道黏膜等疏鬆結(jié)締組(zǔ)織中,它(tā)的增(zēng)多常見(jiàn)於寄生蟲感染(rǎn)的動物和發(fā)生(shēng)I型超敏反應的動物。也由(yóu)於其分布特點,大(dà)多血液寄生蟲不會引起嗜酸性粒細胞增多。此外,還有一些臨床原因可導致嗜酸性粒細胞增多,比如嗜酸性(xìng)粒細胞(bāo)性腸炎、嗜酸性肌炎等炎(yán)症反應;某些能促進(jìn)嗜酸性粒細胞生成和(hé)釋放的腫瘤(淋巴瘤、鱗狀(zhuàng)細胞癌等(děng));腎上腺皮質機能減退等。
白細胞:嗜堿性粒細胞
嗜堿(jiǎn)性粒細胞參(cān)與遲發性過敏和寄生蟲免疫反應,因此嗜堿性粒細胞增多症(zhèng)常和嗜酸性粒細胞增多(duō)症(zhèng)同時發生。此外還(hái)可見於高脂血症、嗜堿(jiǎn)性粒細胞性白(bái)血病和骨髓(suǐ)增(zēng)生(shēng)性疾病。
白(bái)細胞:單核細胞
單核細胞(bāo)等主要功(gōng)能是吞噬作用、調(diào)節炎症反應、參與抗原提呈、參與鐵的調節。因此當機體出現(xiàn)急性或慢性炎症、組織壞死時,都會導致單核細胞增多。中性(xìng)粒細胞減少時也會出現單核細胞代償性增加。其(qí)他不常見的(de)原因還包括應激或類(lèi)固醇、單核細胞白血病等。齧齒類動物中,多達25%的F344大鼠會發(fā)生(shēng)單核細(xì)胞性白血病。發病動(dòng)物(wù)外周血中,可見非典型性單核細胞,白細胞計數極度增高和溶血性(xìng)貧血。
血小板
血小(xiǎo)板為骨髓巨核細胞胞漿(jiāng)裂解脫落的小塊胞(bāo)質,其主要作(zuò)用是凝血和止血,修補破損血管。齧齒類動物的血小板數量和凝血過程與其他哺乳動物相似。在小(xiǎo)鼠、大(dà)鼠或(huò)豚鼠中,未觀察到血小板計數的性(xìng)別或品係差異。大鼠的(de)血(xuè)小板會聚(jù)集,計數往往不(bú)可靠。
血小板減少
血小板減少症發生時,動物可出現瘀斑、瘀點、黏(nián)膜(mó)出血、止血困難等。但(dàn)血液分(fèn)析儀判讀為血小板減少時,應做血塗片確認是(shì)否發生凝集,因(yīn)為(wéi)血小板做血液采集、運輸、儲存過程中會活化並凝集進而影響機器讀取數據。通過無創性靜脈穿刺采血、使用檸檬酸鹽抗凝劑、減少采樣後儲存時間、避免低溫等措施可以減少這種影響。
通常血小板減少是一過性的,跟多種係統性疾病都有關(guān)聯,隨著疾病的康(kāng)複(fù),血(xuè)小板計數也會恢複正常。持續性的或進行性的血小板減少症表明血小(xiǎo)板生成或消耗持續失衡。例如血小板(bǎn)減少伴隨白細胞減少和(或(huò))貧血通常提(tí)示骨髓疾病引起的造血功能障礙;免疫介導的破壞(huài)等。
血小板增多
血小板計數增多可能由原發性血小(xiǎo)板增多症、骨髓增殖性疾病和繼發性血小板增多症引起。